Suodatetut pipetin kärjet niillä on elintärkeä rooli molekyylibiologiassa ja bioteknologiassa, erityisesti työskenneltäessä RNA:n ja muiden herkkien biomolekyylien kanssa. Nämä biomolekyylit vaurioituvat helposti fysikaalisesta, kemiallisesta tai biologisesta kontaminaatiosta, joten on erittäin tärkeää vähentää niiden häviämistä ja kontaminaatiota pipetoinnin aikana. Tässä on joitain tapoja käyttää suodatettuja pipetin kärkiä RNA:n ja muiden herkkien biomolekyylien adsorption vähentämiseksi:
Valitse oikea suodatinkalvo:
Valitse suodatinkalvomateriaalit, joilla on alhaiset adsorptioominaisuudet, kuten erikoiskäsitelty muovi tai silikageeli.
Varmista, että suodatinkalvon huokoskoko on sopiva, jotta neste pääsee kulkemaan tasaisesti samalla, kun estetään hiukkasten ja solujätteiden aiheuttama kontaminaatio.
Optimoi pipetointinopeus ja paine:
Hidas ja tasainen pipetointinopeus voi vähentää biomolekyylien adsorptiota suodatinkalvolle.
Vältä liiallisen paineen tai tyhjiön käyttöä, koska tämä voi lisätä biomolekyylien adsorptiota ja tuhoutumista suodatinkalvolla.
Käytä RNaasi-inhibiittoreita:
Lisää RNA-näytteitä varten RNaasi-inhibiittoria, kuten DEPC:llä (dietyylipyrokarbonaatti) käsiteltyä vettä tai erikoistunutta RNaasi-inhibiittoriliuosta, näytteeseen ennen pipetointia.
Tämä auttaa vähentämään RNA:n hajoamista pipetoinnin aikana.
Pidä näytteet ja pipetin kärjet viileinä:
Herkkien biomolekyylien osalta alhaisten lämpötilojen (kuten 4 °C) ylläpitäminen voi vähentää niiden hajoamista ja adsorptiota.
Käytä jäähdytettyjä pipetin kärkiä ja reagensseja tai käytä jäälaatikkoa kylmän lämpötilan ylläpitämiseen pipetoinnin aikana.
Pienennä pipetointiaikoja:
Minimoi pipetointikertojen määrä vähentääksesi biomolekyylien kosketusta ja adsorptiota suodatinkalvolle.
Jos mahdollista, käytä suurempia pipetointimääriä pipetointiaikojen lyhentämiseksi.
Vältä pinta-aktiivisia aineita sisältäviä liuoksia:
Tietyt pinta-aktiiviset aineet voivat lisätä biomolekyylien adsorptiota suodatinkalvoon.
Yritä välttää pipetointia pinta-aktiivisia aineita sisältävien liuosten kanssa.
Vaihda pipetin kärjet säännöllisesti:
Pipetinkärkien säännöllinen vaihtaminen voi vähentää biomolekyylien adsorptiota suodatinkalvon ikääntymisen tai kontaminoitumisen vuoksi.
Muista tarkistaa pipetin kärkien eheys ja puhtaus ennen käyttöä.
Käytä erityisiä RNA-käsittelytyökaluja:
Erityisissä RNA-sovelluksissa, kuten RNA-sekvensoinnissa tai reaaliaikaisessa kvantitatiivisessa PCR:ssä (qPCR), harkitse erityisesti RNA:ta varten suunniteltujen pipettien ja suodattimien käyttöä.
Näillä työkaluilla on yleensä alhaisemmat RNA-adsorptio-ominaisuudet ja suurempi herkkyys.
Koulutus ja kokemus:
Asianmukainen koulutus ja kokemus voivat parantaa pipetointitekniikoiden tarkkuutta ja johdonmukaisuutta, mikä vähentää biomolekyylien hävikkiä ja kontaminaatiota.
Säännöllinen taitojen arviointi ja palaute voivat auttaa parantamaan laboratorion yleistä suorituskykyä.
Laboratorion puhdistus ja hygienia:
Puhtauden ja hygienian ylläpitäminen laboratoriossa on välttämätöntä biomolekyylien saastumisen vähentämiseksi.
Puhdista laboratorion pinnat, laitteet ja työkalut säännöllisesti ja noudata hyviä laboratoriohygieniakäytäntöjä.