Matalan sitovan pipettivinkkien ymmärtäminen

1. Mitkä ovat alhaiset sitovat pipettivinkit?

Matala sitova pipettivinkit ovat pipettoreille suunniteltuja laboratoriotarvikkeita, joissa on erityisiä pintakäsittelyjä ja/tai on valmistettu tietyistä materiaaleista. Heidän ydinsuunnittelutavoitteensa on vähentää merkittävästi näytteen adsorptiota ja retentiota kärjen sisäseinämään .

• Ydinongelma: Tavallisilla polypropeenikärkillä on pinnat, joissa on luontainen hydrofobisuus ja varaus, mikä voi johtaa tiettyjen näytesokkikomponenttien, erityisesti biomolekyylien (kuten proteiinien, nukleiinihappojen) ja viskoosien liuoksien epäspesifiseen adsorptioon.
• Ratkaisu: Matala sitoutumiskärjet muuttavat sisäseinän pintaominaisuuksia fysikaalisten tai kemiallisten menetelmien avulla, mikä tekee siitä hydrofiilisempiä ja inerttejä, vähentäen siten molekyylien ja kärjen seinämän välisiä vuorovaikutusvoimia.

2. miten ne toimivat (pintakäsittelytekniikka)

Matala sitova vaikutus saavutetaan ensisijaisesti seuraavien tekniikoiden avulla:

• Erityiset polymeerilisäaineet: Sisällyttämällä spesifiset polymeerilisäaineet (esim. Hydrofiiliset modifioinnit) polypropeenipohjamateriaaliin tuotannon aikana, mikä antaa kärjen rungon luontaiset matalan sitoutumisen ominaisuudet. Tämä on nykyinen valtavirran ja vakain menetelmä.
• Pintapäällysteet:
  • Hydrofiiliset pinnoitteet: Hydrofiilisen pinnoitteen (esim. Tietyt polymeeripinnoitteet) levittäminen sisäseinään pinnan kostutettavuuden lisäämiseksi, nesteen pidättämisen ja proteiinien adsorption vähentämiseksi.
  • Inertit pinnoitteet: Sovelletaan erittäin inerttejä pinnoitteita (esim. Tietyt siilaanijohdannaiset) aktiivisten pintakohtien vähentämiseksi ja kemiallisen adsorption minimoimiseksi.
• Erityiset pintakäsittelyt: Polypropeenipinnan mikrorakenteen ja kemiallisten ominaisuuksien muuttaminen fysikaalisilla menetelmillä (esim. Plasmankäsittely) tai kemiallinen etsaus hydrofiilisyyden lisäämiseksi.
• Erittäin korkea puhtaus polypropeeni: Käyttämällä polypropeeniraaka -ainetta erittäin alhaisella epäpuhtauspitoisuudella epäpuhtauksien aiheuttamien mahdollisten adsorptiokohtien vähentämiseksi.

3. Tärkeimmät edut ja ominaisuudet

• Minimoi näytteen menetyksen: Tämä on keskeinen etu. Vähentää merkittävästi arvokkaiden, matalan keskittymisen tai pienten näytteiden adsorptiota ja retentiota (esim. Proteiineja, DNA: ta, RNA: ta, entsyymejä, vasta-aineita, solususpensioita, viskoosisia reagensseja) kärjen seinämään, varmistaen pipetoinnin tarkkuus ja palautus .
• Parantaa kokeellista tarkkuutta ja toistettavuutta: Vähentynyt adsorptio tarkoittaa johdonmukaisempia annostelumääriä, näytteen siirtymisen aiheuttamien kokeellisten virheiden alentamista ja tulosten parantamista luotettavuus ja toistettavuus .
• Vähentää ristikontaminaatioriskiä: Täydellisempi nestemäinen karkotus ja vähemmän näytejäämiä alentavat ristikontaminaation riskiä, ​​kun piipet peräkkäin eri näytteitä.
• Ihanteellinen arkaluontoisiin sovelluksiin: Minimoi vaikutukset näytteen aktiivisuuteen, mikä tekee niistä erityisen sopivia adsorptioherkkään kokeisiin molekyylibiologiassa, solubiologiassa, proteomiikassa, diagnostiikassa jne.
• Parantaa kostutettavuutta: Tyypillisesti on parempaa hydrofiilisyyttä, jolloin neste voi virrata sujuvammin kärjen sisällä, vähentäen meniskin tarttumista ja kuplan muodostumista, mikä johtaa tasaisempaan pipetointitoimintaan.

4. Avainsovellukset (mitkä kokeet erityisesti niitä tarvitsevat?)

Matalat sidontavinkit ovat erittäin suositeltavia, melkein välttämättömiä seuraavissa sovelluksissa:

• Molekyylibiologia:
  • Korkean suorituskyvyn PCR, QPCR, DDPCR: Vähentää DNA/templaatti-häviämistä, varmistaen monistustehokkuuden ja kvantifioinnin tarkkuuden.
  • Nukleiinihapon puhdistus ja kirjaston valmistus: estää arvokkaiden DNA/RNA -fragmenttien menetyksen puhdistuksen aikana.
  • NGS -näytteen valmistelu: Pienikirjastojen tarkka pipetointi on kriittistä.
• Proteiinitutkimus:
  • Proteiinipitoisuusmääritykset (BCA, Bradford jne.): Proteiinien adsorptio estää pitoisuuden aliarviointia.
  • Entsyymiaktiivisuusmääritykset/kinetiikka: Varmistaa tarkan entsyymimäärän ja välttää aktiivisuushäviöt.
  • Western blot -näytteen valmistus: Proteiinien tarkka pipetointi puskureissa, jotka sisältävät SDS: tä tai pelkistäviä aineita.
  • Proteiinien puhdistus (esim. Affiniteettikromatografiafraktioiden keruu): Vältetään kohdeproteiinin menetys.
• Soluviljelmä ja siihen liittyvät kokeet:
  • PALAUTTAMINEN/PARKAATTU PALJON Solulinjoja tai primaarisia soluja: Vähentää solun tarttumishäviötä kärjen sisällä.
  • Solujen elinkykyiset määritykset: Solususpensioiden ja reagenssien tarkka pipetointi.
  • Transfektio: DNA: n, RNA: n, transfektioreagenssikompleksien tarkka pipekointi.
• Diagnostiikka ja kliininen testaus: ELISA, kemiluminesenssit immunomääritys, POCT: Varmistaa tarkan näytteen ja reagenssin määrät parantaen havaitsemisherkkyyttä ja tarkkuutta.
• Viskoosit tai vaahtoalttiit ratkaisut: Glyseroli, DMSO, pinta -aktiiviset liuokset, tietyt puskurit: vähentää retentiota ja siirtymistä, mikä parantaa pipetointitarkkuutta.
• Jokainen kokeilu, joka sisältää arvokkaita, pieniä näytteitä tai vaatii suurta tarkkuutta ja toistettavuutta.

5. Kuinka valita oikea matala sitova pipetin kärki?

• Yhteensopivuus: Ensisijainen vaatimus on, että he pakottaa Ole täysin yhteensopiva pipettibrändin ja mallin kanssa. Varmista aina yhteensopivuusluettelot tai ota yhteyttä valmistajan oppaaseen ennen ostamista.
• Sertifikaatit ja laatu:
  • Sertifioitu RNaasi/DNase/Pyrogeen-vapaa: Tärkeä molekyylibiologian ja soluviljelykokeiden kannalta. Varmista luotettava sertifikaatti.
  • Sertifioitu PCR-estäjävapaa: Erittäin tärkeä PCR/QPCR -sovelluksissa.
  • Valmistuksen laatu: Korkealaatuinen valmistus varmistaa tarkan mitat, jatkuvan muodon, BURR: n puuttumisen ja hiukkasten saastumisen puutteen (puhtausaste). Valitse hyvämaineiset tuotemerkit.
• Matala sitova suorituskykytaso: Suorituskyky voi vaihdella tuotemerkkien ja sarjojen välillä. Kiinnitä huomiota valmistajan tarjoamiin suorituskykytietoihin (esim. Proteiinin adsorptiojäämien testiraportit). Erittäin vaativiin sovelluksiin (esim. Yksisoluinen sekvensointi, erittäin matala runsausproteiinin havaitseminen), ylimmän tason matala sitoutumisvinkit voivat olla tarpeen.
• Pakkaus ja steriiliys:
  • Pakkausmuoto: RAKETTU (pinottu tai irtotavarana), pussitettu, suodatettu (valinnainen). Valitse työnkulku- ja automaatiotarpeisiin sopiva pakkaus.
  • Suodatetut vinkit: Jos vaaditaan pipetti -akselin aerosolin saastumista, valitse alhaiset sitoutumiskärjet suodattimilla (matala sitoutumissuodattimen kärjet). Itse suodattimen tulisi myös olla matala sitova.
  • Esisteriloitu: Useimmat kokeet vaativat ennalta steriloidut kärjet (tyypillisesti gamma-säteilytetyt). Varmista sterilointimenetelmä ja steriiliysvarmistusaste (SAL). Ei-steriilit vinkit sopivat joihinkin ei-kriittisiin sovelluksiin tai jos laboratorio suorittaa oman steriloinnin.
• Kustannustehokkuus: Pienet sidontavinkit ovat yleensä kalliimpia kuin vakiovinkit. Arvioi kustannustehokkuus täyttäessään suorituskykyvaatimuksia. Älä tee kompromisseja kriittisissä kokeissa käyttämällä tavanomaisia ​​vinkkejä kustannusten säästämiseen, koska epätarkkojen tietojen tai näytteen menetys voi johtaa suurempaan jätteeseen.

6. Käyttö muistiinpanot

• Oikea kiinnitys: Varmista, että kärki on kiinnitetty tiukasti ja tiukasti pipettiin ilman aukkoja ilmanvuotojen ja epätarkkojen määrien estämiseksi.
• Ennakkovesi: Viskoosissa tai haihtuvissa nesteissä esikäsittely (nesteen aspiraatio ja jakaminen muutaman kerran ennen todellista siirtoa) voi joskus parantaa tarkkuutta (jopa alhaisella sitoutumiskärjellä). Noudata pipetin käyttöohjeita.
• Vältä kosketusvinkin päätä: Ylläpitää steriiliyttä ja estä saastumista.
• Varastointi: Säilytä viileässä, kuivassa paikassa pois suorasta auringonvalosta ja pölystä. Huomaa pakkauksen voimassaolopäivä.